人上皮细胞粘附分子（Ep-CAM）ELISA试剂盒简介

人生就是博-尊龙凯时的ELISA试剂盒专为科学研究开发，不适用于医学诊断。试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验（ELISA）原理。

检测原理

本试剂盒通过预先包被的adropin（AD）抗体的微孔中，依次加入样品、标准品和HRP标记的检测抗体，经过温育后彻底洗涤，用底物TMB显色。在过氧化物酶的催化下，TMB转变为蓝色，随后在酸作用下变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关，可在450nm波长下用酶标仪测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成

• 96孔配置：12孔×8条
• 48孔配置：12孔×4条
• 标准品：03mL*6管
• 样本稀释液：6mL
• 检测抗体-HRP：10mL
• 20×洗涤缓冲液：25mL
• 底物A：6mL
• 底物B：6mL
• 终止液：6mL
• 封板膜：2张
• 说明书：1份
• 自封袋：1个

注：标准品（S0-S5）浓度分别为：0、25、50、100、200、400 pg/mL。试剂盒请在2-8℃环境下保存，保质期为6个月。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，避免细胞刺激，收集后以3000转离心10分钟分离血清与红细胞。
2. 血浆：采用EDTA、柠檬酸或肝素抗凝，3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去掉颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织与生理盐水混合，搅拌后3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：样本需按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融。在室温下解冻并确保样品均匀。

自备物品

• 酶标仪（450nm）
• 高精度加样器及枪头：05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
• 37℃恒温箱

操作步骤及注意事项

1. 试剂盒从冷藏中取出后，需在室温下平衡15-30分钟后再使用，未用完的板条应存放在密封袋中。
2. 洗涤液可能有结晶，请在水中加热稀释，洗涤不影响结果。
3. 各步骤加样需使用加样器，并定期校对准确性，控制加样时间在5分钟内，样本量大时推荐使用排枪加样。
4. 每次实验应同时制作标准曲线，若样本OD值过高需稀释，计算时乘以稀释倍数。
5. 封板膜限一次性使用，以防交叉污染。
6. 遵循说明书操作，试验结果以酶标仪读数为准。
7. 底物需避光保存。
8. 样品、洗涤液及废弃物需按传染病处理。
9. 不同批次的试剂不可混用。

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